Preuve d’activité avec AMD, un inhibiteur biodisponible par voie orale de type CXCR-Tropic VIH

L’étude X Antagonist Concept Trial étudie l’innocuité et l’activité antivirale de la DMLA, un puissant inhibiteur du virus de l’immunodéficience humaine à VIH tropique in vitro chez des patients infectés par le VIH hébergeant des virus X-tropiques. rlu; par le Monogram Trofile Assay et un niveau VIH-ARN ⩾ copies / mL Patients traités par AMD en monothérapie pendant trop de jours Le tropisme des corécepteurs, le taux plasmatique d’ARN VIH et le nombre de cellules CD ont été mesurés à l’étude, le jour et le jour. Le patient a reçu une dose unique de DMLA en monothérapie chez les patients et de mg chez les patients deux fois par jour pendant plusieurs jours. Le nombre moyen de cellules CD initiales était de cellules / mm, et le taux médian d’ARN du VIH était de , copies / mL Quatre des patients évaluables ont obtenu une réduction de la population de virus X de ⩾-log rlu Le changement médian dans la population de virus X à la fin du traitement était – log & gt; gamme rlu, – pour se connecter & gt; Trois des patients qui ont répondu au traitement ont montré un changement de tropisme des virus tropicaux doubles ou mixtes vers un virus exclusivement R le jour. Aucun effet indésirable grave lié au médicament, événement indésirable de grade supérieur ou anomalie de laboratoireConclusionCes résultats démontrent l’activité d’AMD, le premier antagoniste oral du CXCR, contre le VIH à tropisme X- Le médicament a été bien toléré, sans problèmes de sécurité graves. La DMLA est en attente clinique en raison des modifications histologiques du foie observées dans les études animales à long terme; des évaluations de sécurité précliniques supplémentaires sont en attente

Le développement de pharmacorésistance et d’effets toxiques attribuables aux agents antirétroviraux actuels a incité les chercheurs à découvrir de nouveaux agents antirétroviraux dotés de mécanismes d’action uniques Le blocus du processus d’entrée virale est l’une des cibles de l’investigation active L’attachement du virus au récepteur CD humain déclenche un changement conformationnel de la glycoprotéine d’enveloppe virale, gp, facilitant la liaison à l’un des corécepteurs, CCR ou CXCR, conduisant à la fusion de membranes virales et cellulaires et à l’entrée virale [, -] Les virus peuvent être exclusifs dans leur utilisation de corécepteurs, à savoir R tropique R tropique, tropique X tropicale CXCR, ou tropique double, ce qui indique la capacité à utiliser soit CXCR ou CCR comme corécepteur X-tropique et double-tropique souches émergent généralement plus tard dans la maladie en% -% des individus infectés La présence du virus X du virus CXCR est associée à une diminution accélérée du nombre de cellules CD et de la maladie. progression [, -] Maraviroc, le premier antagoniste du CCR, a été approuvé pour les patients prétraités infectés par le VIH et résistants aux antirétroviraux multiples In vivo, le VIH n’utiliserait que le CCR et le CXCR. On a constaté que les inhibiteurs d’entrée sont synergiques in vitro Pour ces raisons, il existe un vif intérêt pour le développement d’agents capables de bloquer l’entrée du virus XAMD également connu sous le nom d’AMD ou un nouveau, sélectif, biodisponible, et antagoniste réversible à petites molécules de CXCR Il a été démontré qu’il inhibe la réplication du VIH à tropisme X dans les PBMC et d’autres lignées cellulaires in vitro In vitro, il inhibe la liaison du ligand chimiokine naturel, SDF-α, à CXCR et inhibe les mécanismes de signalisation induits par le SDF-α Un inhibiteur de la CXCR à petite molécule, la DMLA, a déjà démontré une activité antivirale chez des patients infectés par le VIH dans une étude de phase dans laquelle il était administré par -h con perfusion intraveineuse continue pendant plusieurs jours Un participant hébergeant uniquement le virus X a montré une réduction du taux d’ARN du VIH de -log copies / mL, et des patients porteurs de virus tropicaux doubles ou mixtes ont montré une réduction de la population du virus X après traitement. , Bridger, JM Whitcomb, données non publiées Cette activité observée bloqué du récepteur CXCR comme une cible antiviraleX virus à tropisme sont de plus en plus fréquents que le nombre de cellules CD diminue Leur présence peut être démasquée par la thérapie antirétrovirale, en particulier avec Antagonistes du RCC Comme la plupart des patients porteurs de virus X-tropiques portent également des virus R-tropiques, l’activité d’un antagoniste X en monothérapie ne devrait pas se traduire par un changement significatif de la charge VIH. Monogram Biosciences, qui utilise la luciférase pour produire une lecture lumineuse indiquant les niveaux de virus X ou R, fournit un rapport semi-quantitatif et qualitatif de tropisme viral Pour cette raison, la réduction de la population de virus X par le test Trofile a été choisie comme principal critère d’efficacité pour l’étude des antagonistes X. Cette technologie de dépistage ne fait pas la distinction entre virus tropicaux et mélanges de tropiques R et X L’XACT a évalué l’innocuité et l’activité antivirale de la monothérapie par AMD pendant des jours chez des individus infectés par le VIH et porteurs de virus X-tropiques. les critères d’évaluation primaires étaient la proportion de patients qui avaient une réduction de leur taux de virus X tropique d’unités de luminescence relative ⩾-log rlu, tel que déterminé par le test Trofile, et les changements dans la population de virus X relation entre les paramètres pharmacocinétiques et la réponse virale, les changements dans le nombre de cellules CD, la charge plasmatique de VIH, le nombre de globules blancs et le nombre de cellules CD

Patients et méthodes

Cadre d’étude et population de patients XACT était une étude de détermination de dose à centre unique, ouverte, à un seul bras, menée à l’hôpital Chelsea Westminster de Londres (Royaume-Uni) et au Orlando Immunology Center d’Orlando (Floride). Comité d’éthique de la recherche et le Sterling Institutional Review Board et a été menée conformément à la Déclaration de Helsinki Consentement écrit a été obtenu de tous les participants à l’étude avant toute procédure d’étude ont été réalisées Cette étude a été enregistrée à http: // clinicaltrialsgov NCTHIV patients infectés âgés de ⩾ ans qui avait un nombre de cellules CD & lt; Les patients sous traitement antirétroviral recevant un traitement antirétroviral devaient avoir une période de lavage d’au moins jours avant l’entrée dans l’étude pour limiter le risque d’interactions médicamenteuses entre les agents antirétroviraux établis et le médicament à l’étude Les patients devaient démontrer la présence du virus X-tropique ou du virus à double tropique avec une population de virus X de l’activité luciférase dans le test Trofile En raison du risque d’interactions médicamenteuses, l’utilisation de Les inhibiteurs ou inducteurs du CYP-A, les inhibiteurs ou inducteurs de la P-glycoprotéine et les substrats du CYP-D et du CYP-C étaient interdits dans l’étude. Les participants éligibles à l’étude pour la première cohorte recevaient une dose unique de monothérapie par AMD deux fois par jour. estomac pendant plusieurs jours consécutifs Toutes les doses quotidiennes étaient administrées une fois le matin et une fois le soir. Les participants pouvaient reprendre ou commencer un traitement antirétroviral le jour. On a recueilli des échantillons pour la détermination des numérations cellulaires CD et CD, du niveau d’ARN du VIH et du tropisme du corécepteur du VIH Trofile et pour des évaluations de laboratoire de sécurité clinique. En outre, des échantillons ont été prélevés à l’entrée et à la sortie de l’étude. jour pour les résultats des tests de sensibilité à la DMLA non rapportés. Surveillance des effets indésirables des EI, des médicaments concomitants et des signes vitaux; examen physique dirigé contre les symptômes; et électrocardiographie ont été effectuées quotidiennement tout au long de la période d’étude et pendant les visites de suivi. Les EI et les anomalies de laboratoire ont été classées selon la classification de l’Institut national des allergies et des maladies infectieuses du Tableau SIDA pour la sévérité des effets indésirables chez les adultes. par des tests sanguins intensifs pour les niveaux de DMLA le jour à,,,,,,,,,,,,,, et h après l’avant-dernière dose matinale d’AMD analyse pharmacocinétique urinaire a également été effectuée le jour Tous les échantillons pharmacocinétiques En raison des modifications histologiques du foie observées dans les études de toxicité animale à long terme, cette étude a été interrompue. Analyse des données Les principaux objectifs de cette étude étaient de: déterminer l’innocuité et l’activité antivirale de la DMLA administrée pendant plusieurs jours afin de déterminer la proportion de patients Les auteurs ont utilisé la moyenne géométrique des mesures de pré-entrée et d’entrée pour définir la ligne de base. La proportion de patients ayant répondu On a évalué les traitements à l’aide de statistiques descriptives. Les objectifs secondaires comprenaient le tropisme des récepteurs, les paramètres pharmacocinétiques, le taux plasmatique d’ARN du VIH et le taux de CD. Les paramètres de sécurité comprenaient des évaluations cliniques et de laboratoire et la surveillance des EI et des médicaments concomitants. Les concentrations plasmatiques de DMLA ont été déterminées à l’aide d’une méthode validée de spectrométrie de masse en tandem par chromatographie en phase liquide haute performance .

Résultats

Population de patients Dix patients hommes et femmes âgés de – ans âge médian, des années ont été inclus dans l’étude Il y avait des patients blancs%, patients hispaniques%, patients afro-américains%, et patients% avec héritage mixte Tableau montrant les caractéristiques de base des participants à l’étude Ce patient a été inclus dans toutes les évaluations d’innocuité et de pharmacocinétique. Chez les patients évalués pour l’efficacité, le nombre moyen de cellules CD initiales était de cellules / mm de gamme, – À l’entrée dans l’étude, les patients avaient un virus mixte ou double, avaient le virus X seulement, et avaient le virus R seulement ce patient a été exclu de la liste des cellules / mm, et le taux médian d’ARN du VIH était de analyse de l’efficacité Les valeurs médianes initiales du virus X et du virus R chez les patients évaluables étaient log & gt; gamme rlu, – log & gt; rlu et log & gt; gamme rlu, – log & gt; rlu, respectivement A l’exception du patient mentionné ici, des valeurs similaires ont été observées au dépistage et au départ pour les taux d’ARN-VIH, de X et de R

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et de base des patients inscritsTable View largeTélécharger la lameDonnées démographiques et de base des patients inscritsSécurité Tous les patients inclus ont été inclus dans toutes les analyses de sécurité Le seul EI grave signalé était la saisie chez un patient épileptique connu ayant interrompu le traitement antiépileptique. sans lien avec le médicament à l’étude Un total d’effets indésirables liés aux médicaments a été rapporté par les patients Tous les EI, sauf ceux liés aux médicaments, étaient de grade sévère. La diarrhée était l’EI liée au médicament la plus fréquemment signalée chez [%] des patients; Tous les cas étaient de grade sévère Grade de mal de tête, flatulence et étourdissements ont tous été signalés une fois Aucune anomalie de laboratoire de grade ou plus élevé n’a été observée Il n’y avait pas de résultats de laboratoire de sécurité cliniquement significatifs hors de portéeRéduction au niveau du virus X tropique réponse des patients En raison de l’erreur de dosage, les patients ont reçu seulement mg ​​de DMLA deux fois par jour plutôt que la dose de mg définie par le protocole Trois patients ont atteint le critère principal de réduction de la de & gt; -log & gt; rlu La plus grande réduction de la population X réalisée était log & gt; rlu chez un patient ayant reçu la dose -mg Un patient a démontré une réduction de la population X de log & gt; rlu le jour mais a montré une réduction de -log & gt; Par conséquent, lorsque la réduction maximale pendant le traitement a été considérée, les patients ont montré une réduction de la population de virus X de ⩾-log rlu Les populations de virus X de tous les patients ayant répondu au traitement ont augmenté après l’achèvement du traitement. Niveaux de référence par jour En revanche, le niveau de virus R est resté inchangé au cours de la période d’étude Dans l’ensemble, les patients évaluables ont démontré un changement médian dans la population de virus X de – log & gt; gamme rlu, – pour se connecter & gt; Rlu de la ligne de base à la fin du traitement

Figure Vue largeDownload slideLog population de virus X dans les unités de luminescence relative [rlu] dans les échantillons des patients pendant la période d’étude Les patients qui ont répondu à la thérapie sont représentés par des traits pleins; Les patients qui n’ont pas répondu à la thérapie sont représentés par des pointillés. Voir en grandDownload slideLog X population de virus dans les unités de luminescence relative [rlu] dans les échantillons des patients pendant la période d’étude Les patients ayant répondu à la thérapie sont représentés par des traits pleins; Les patients qui n’ont pas répondu au traitement sont représentés par des pointillés. Changement dans le tropisme corécepteur Le tropisme, tel que déterminé par le test Trofile, est indiqué dans le tableau La plupart des patients évaluables ont été signalés comme ayant un virus tropique ou mixte. ou tropisme mixte à l’entrée de l’étude inclus tous les patients qui ont répondu à la thérapie et des patients qui n’ont pas répondu à la thérapie Deux des patients qui n’ont pas répondu à la thérapie ont tropisme X à l’entrée de l’étude

TableauTaille largeTropism dans les bassins viraux des patientsTable View largeDisplayTropism dans les bassins viraux des patientsThree de patients qui ont répondu à la thérapie ont démontré un passage du tropisme double ou mélangé au tropisme R pendant le traitement Le passage au tropisme R est revenu au tropisme Inversement, tous les patients, sauf ceux qui n’ont pas répondu au traitement, ont maintenu le même tropisme tout au long de l’étude. Un patient qui n’a pas répondu au traitement et qui avait un tropisme ou tropisme mixte le jour mais retourné au tropisme X par jour Autres paramètres d’efficacité La charge VIH, le nombre de cellules CD, le taux de R et le nombre de globules blancs chez les patients évaluables sont présentés dans le tableau Pas de changements significatifs dans le taux d’ARN VIH , Le taux de virus R et le nombre de globules blancs ont été observés pendant la période de traitement. Un patient patient; qui n’a pas répondu à la thérapie a démontré une réduction de la charge de VIH de & gt; -log & gt; copies / mL, alors qu’un autre patient patient; qui ont répondu à la thérapie ont montré une augmentation de la charge de VIH de & gt; -log copies / ml sur jour Aucun changement significatif dans le niveau d’ARN du VIH n’a été observé chez les autres patients Le niveau de virus R chez les patients n’a pas changé de manière significative, indépendamment de la l’inhibiteur X, ce qui suggère que la suppression du virus X par AMD n’a pas entraîné une augmentation des taux de virus R

Tableau View largeDownload slideAutres paramètres d’efficacitéTable View largeDownload slideAutres paramètres d’efficacitéParamètres pharmacocinétiques AMD a été bien absorbé après administration orale et éliminé du plasma de manière biexponentielle Les ratios de – à -mg concentration maximale de médicament et de surface sous la courbe à -h étaient et, respectivement ; Ceci suggère une augmentation plus que proportionnelle de l’exposition avec tableau de doublement de la dose. L’accumulation de DMLA était indiquée par les augmentations observées dans les concentrations minimales. La tendance à la hausse des concentrations plasmatiques minimales suggère que l’état d’équilibre peut ne pas être atteint après deux jours d’administration. régime journalier La concentration médiane minimale de médicament à la journée était de ng / mL, – ng / mL dans le groupe de dose -mg, qui était proche de la concentration efficace in vitro ajustée aux protéines pour inhiber le% de virus ~ ng / mL de DMLA contre le virus X-tropique dans les PBMC ; ceci suggère que cette dose serait associée à une activité antivirale in vivo. Cependant, aucune relation n’a été observée entre les paramètres pharmacocinétiques de la DMLA et la réduction de la population de virus X sur la table de jour.

Vue de la table Paramètres de la pharmacocinétique de slideAMD dans le concept X Antagonist Étude de casTable Afficher les paramètres pharmacocinétiques du slideAMD dans l’étude d’essai X Antagonist Concept

Discussion

sm a été le résultat d’une suppression sélective du virus majoritairement X majoritaire par le médicament à l’étude, ce qui a conduit à la « démasquage » du virus mineur R, notant que ce patient présentait également la plus forte population de virus X à l’entrée. Il a été démontré que les expositions obtenues dans cette étude représentent l’extrémité inférieure d’une courbe dose-réponse, où la variabilité de la réponse peut être attendue. Facteurs viraux, comme la proportion de virus X et la charge virale globale à l’entrée dans l’étude, peuvent contribuer à l’activité aux doses étudiées Tous les patients qui ont répondu à la thérapie avaient des populations de virus X relativement faibles. log & gt; Cette constatation peut refléter le fait que ces patients avaient de vrais mélanges de virus X et R, alors que certains individus avec de fortes populations de virus X pouvaient avoir un virus à double tropique. Cependant, parmi les patients n’ayant pas répondu à Nous avons observé aucune relation entre le nombre de cellules CD et la réponse au virus X Les données préliminaires de sensibilité à la DMLA sur des échantillons prélevés à l’entrée de l’étude n’ont révélé aucune relation entre la sensibilité de l’isolat du patient et l’efficacité de la DMLA. Chez chaque patient, l’absence de changements dans le taux d’ARN VIH, tant chez les patients que chez les patients ayant répondu au traitement, a été anticipée et fait écho aux résultats de l’étude de preuve de concept avec l’antagoniste CXCR AMD . La charge VIH a été observée, malgré une analyse rétrospective qui a démontré que les patients porteurs de virus à double En revanche, bien qu’une leucocytose ait été observée chez des volontaires sains et chez des patients infectés par le VIH recevant de la DMLA, ainsi que chez des volontaires sains recevant une DMLA , elle n’a pas été observée chez les patients infectés par le VIH. DMLA Cette observation peut être le reflet de la DMLA et de l’AMD appartenant à différentes classes chimiques ayant des caractéristiques pharmacologiques cliniques différentes , bien qu’ils partagent la même cible cellulaire. Le manque apparent de leucocytose chez les patients infectés par le VIH pourrait être attribuable aux différences de L’utilisation de la population de virus X n’est pas un moyen conventionnel d’évaluation de l’activité, mais reflète la technologie de diagnostic émergente et le nouveau récepteur hôte ciblé par la DMLA. La cohérence des taux de virus R chez les patients l’étude confirme l’activité et la spécificité de la DMLA et valide également l’utilisation de la population du virus X pour évaluer activité des antagonistes du CXCR La sensibilité de cette version de Trofile pour détecter les espèces minoritaires dans les populations virales mixtes est de% -% Cette fréquence varie également en fonction de l’infectivité des espèces minoritaires L’utilisation du test comme outil de dépistage a été validée dans le programme de développement de l’antagoniste du CCR maraviroc Cependant, ce test est incapable de différencier un changement absolu et relatif des populations virales, et l’unité quantitative rlu n’est pas une mesure de la composition virale X et R Pour ce étude, ce test a permis une estimation de l’activité et, surtout, servi de passerelle vers l’utilisation du niveau d’ARN du VIH classique dans une étude qui permet la combinaison de la DMLA et d’autres agents antirétroviraux. les implications restent incertaines pour le moment X et les virus mixtes ou doubles sont associés à une diminution plus rapide du nombre de cellules CD et au risque de progression clinique par rapport aux virus R seuls ; Ainsi, la suppression de ces virus peut avoir une importance clinique. Le développement clinique de la DMLA a été interrompu en raison des observations histologiques observées dans le foie lors d’études à long terme sur des animaux. Jusqu’à présent, les études sur l’homme n’ont montré aucune anomalie des taux d’alanine aminotransférase, d’aspartate aminotransférase et de bilirubine totale suggérant des effets toxiques hépatiques après plusieurs jours de traitement de la DMLA. Des études supplémentaires peuvent confirmer l’innocuité de la DMLA à long terme. chez l’homme, on peut s’attendre à l’administration d’AMD en association avec un antagoniste du CCR, en présence ou en l’absence d’un schéma de squelette optimisé. Dans ce cas, les bénéfices cliniques d’un antagoniste du CXCR peuvent être réellement évalués. de ce premier antagoniste oral de la CXCR contre le VIH à tropisme X. Les résultats montrent également que le médicament de l’étude était bien toléré, sans sérieux problèmes de sécurité D’autres évaluations précliniques et cliniques sont nécessaires pour examiner pleinement le potentiel de la DMLA pour le traitement de l’infection par le VIH

Remerciements

Nous remercions tous les patients d’avoir participé à l’étude; personnel sur le site clinique, pour l’aide dans la conduite de l’étude; et Chitra Ayer, pour la gestion des donnéesAnorMED, une filiale à part entière de Genzyme CorporationPotential conflits d’intérêts RSW, CG, KB, RM, GC, GB et SB étaient des employés d’AnorMED lorsque l’étude a été menée Tous les autres auteurs: pas de conflits