Innocuité et immunogénicité du vaccin contre le streptocoque du groupe A chez les volontaires sains adultes

Contexte Le streptocoque du groupe A provoque des maladies allant de la pharyngite non compliquée à la fasciite nécrosante potentiellement mortelle, au choc toxique et au rhumatisme articulaire. Les tentatives de développement d’un vaccin à base de protéines M ont été entravées par le fait que certaines protéines M suscitent à la fois des anticorps protecteurs et des anticorps. réactions croisées avec les tissus humains De nouvelles techniques moléculaires ont permis de surmonter largement les obstacles antérieurs. Méthodes Le vaccin est constitué de protéines recombinantes adsorbées sur l’hydroxyde d’aluminium qui contiennent des peptides N-terminaux de l’antigène protecteur streptococcique et des protéines M de la pharyngite vulvaire invasive. ou sérotypes rhumatogènes Trente sujets adultes en bonne santé ont reçu un vaccin anti-SGA intramusculaire-valent μg à, et mois, avec un suivi clinique et biologique pour l’innocuité et l’immunogénicité en utilisant des anticorps anti-réactifs croisés, des anticorps M spécifiques aux antigènes vaccinaux, et activité d’opsonisation fonctionnelle de l’anticorps de protéine M Résultats L’incidence de la réactogénicité locale était similaire à celle des autres vaccins adsorbés à l’hydroxyde d’aluminium chez les adultes. Aucun sujet n’a développé d’évidence de rhumatogenèse ou de néphritogénicité, et aucune induction d’anticorps humains réactifs aux tissus n’a été détectée Globalement, les peptides antigéniques ont évoqué un & gt; Augmentation de la moyenne géométrique du titre d’anticorps par rapport à la ligne de base La moyenne des log-anticorps dans les échantillons de sérum obtenus après immunisation a été observée dans les tests d’opsonisation. Pour tous les sérotypes M Conclusions Sur la base de données épidémiologiques démontrant que la majorité des cas de pharyngite, de fasciite nécrosante et d’autres infections streptococciques invasives sont causés par un nombre limité de sérotypes, ce vaccin courant pourrait avoir un impact significatif sur le fardeau global des streptocoques maladie

Streptococcus pyogenes streptocoque du groupe A [GAS] est un pathogène humain important qui provoque un million d’infections par an aux États-Unis Bien que la pharyngite non compliquée et les infections de la peau et des tissus mous représentent la majorité des infections, l’incidence de la vie L’infection non compliquée peut entraîner des séquelles graves, telles que le rhumatisme articulaire aigu et la glomérulonéphrite. La fièvre rhumatismale aiguë continue d’être une cause majeure de cardiopathie dans le monde et son incidence. a augmenté en Amérique du Nord Le fardeau de la maladie attribuable au GAS dans le monde a stimulé les efforts de développement de vaccins datant de plus de décennies La protéine M de surface est le principal déterminant de virulence et antigène protecteur du SGA. , Les anticorps protéiques M sont opsoniques et favorisent l’ingestion et la destruction du SGA par les cellules phagocytaires Le vaccin GAZ a été gêné par le fait que, bien que certains épitopes protéiques M induisent des anticorps protecteurs de type spécifique, d’autres peuvent induire des anticorps qui interagissent avec le cœur, le cerveau, le rein ou le cartilage articulaire humain. La compréhension de la biologie du GAS a permis le développement de vaccins multivalents à base de protéines M qui contiennent des épitopes protecteurs et excluent les épitopes croisés potentiellement dangereux du tissu. Le vaccin multivalent utilisé dans cette étude a été conçu pour inclure des épitopes protecteurs des sérotypes responsables de% -% des cas de pharyngite non compliquée et de maladie grave et invasive Nous présentons les résultats de la première étude de phase I sur la sécurité et l’immunogénicité d’un vaccin recombinant à base de protéine Spa M à base d’un antigène protecteur valent plus streptococcique

Patients, matériaux et méthodes

Vaccin StreptAvax ID Biomedical, un vaccin recombinant multivalent contenant des fragments de protéine M amino-terminaux de différents sérotypes de GAS, a été décrit ailleurs Le vaccin contenait des protéines de fusion recombinantes contenant chacune des peptides M N-terminaux liés en sérotypes tandem. ils étaient connus pour être une cause fréquente de pharyngite non compliquée, s’ils étaient généralement retrouvés dans des sites corporels normalement stériles dans le réseau de surveillance actif du noyau bactérien, ou s’ils étaient actuellement ou historiquement considérés comme «rhumatogènes» [,,,] Le fragment peptidique terminal de Spa, un antigène de surface nouvellement décrit du GAS connu pour provoquer des anticorps opsoniques, a également été inclus comme antigène thymatique Les protéines multivalentes purifiées ont été combinées en quantités égales en poids et adsorbées à l’hydroxyde d’aluminium pour délivrer μg de protéines et μg d’hydroxyde d’aluminium en mL

ont été exclus s’ils avaient des antécédents ou des échocardiographies de cardiopathie valvulaire, d’endocardite antérieure, d’anomalie cardiaque congénitale, d’autres maladies cardiaques significatives ou de signes ou de symptômes évocateurs de fièvre rhumatismale. Les critères d’exclusion comprenaient également des antécédents familiaux de rhumatisme articulaire aigu ou une histoire personnelle. d’insuffisance rénale aiguë, de glomérulonéphrite post-streptococcique, de chorée ou de polyarthrite intermittente ou de présence d’anticorps sériques croisés, tels que déterminés par les résultats d’essais d’immunofluorescence indirecte utilisant des coupes congelées de coeur humain, de rein, de cartilage, de ganglions basaux et de cortex cérébral. Il s’agissait d’un essai de phase I monocentrique en ouvert. Les sujets ont reçu une injection deltoïde intramusculaire de vaccin les jours d’étude, et les participants ont été suivis pendant min après l’immunisation pour tout effet indésirable immédiat et par auto-évaluation pour les réactions vaccinales. avec l’utilisation d’un journal des symptômes pendant des jours après immunizati Une infirmière a fait des appels téléphoniques de suivi à chaque sujet au ~ et ~ h après la vaccination pour s’assurer que des réactions significatives n’ont pas été omises. Tous les sujets ont subi un examen physique complet incluant auscultation cardiaque et examen neurologique au départ et à la dernière année de visite. première dose et examens de dépistage neurologique et cardiaque à, et semaines après chaque dose de vaccin L’échocardiographie transthoracique et l’électrocardiogramme ont été réalisés au début et à la fin de la troisième dose et examinés par l’un des cardiologues de l’étude pour toute anomalie. chaque dose de vaccin a été administrée et des semaines après l’administration de chaque dose. Des échantillons de sang ont été prélevés avant, et avant et après chaque dose de vaccin pour la mesure des paramètres biochimiques et hématologiques sériques, niveau de troponine I cardiaque, niveau CRP de protéine C réactive , et le complément du sérum C niveau Scre La recherche d’anticorps réagissant de manière croisée aux échantillons de cœur, de rein, de cartilage, de ganglions de la base et du cortex cérébral a été réalisée par immunofluorescence au départ et quelques semaines après l’administration des deuxième et troisième doses de vaccin. , IgM et IgG par ELISA en utilisant des peptides recombinants copiant chacun des composants du vaccin et des anticorps bactéricides par dosage bactéricide indirect Les résultats ont été exprimés comme la réduction des doublements bactériens dans les échantillons sériques obtenus après immunisation, comparés aux échantillons sériques obtenu avant l’immunisationAnalyse des données et considérations statistiques Les événements indésirables ont été tabulés par jour et par gravité; la taille et la sévérité maximales rapportées ont été utilisées dans chaque intervalle de temps. Les réactions vaccinales sollicitées ont été désignées comme température douce, ⩾ ° C et & lt; ° C; réaction au site d’injection, & lt; mm de diamètre; et symptôme facilement toléré, température modérée, ⩾ ° C et ° C; réaction au site d’injection, ⩾ mm et & lt; mm de diamètre; et les symptômes ont causé des interférences avec les activités habituelles et une température sévère, ⩾ ° C; réaction au site d’injection, diamètre de ⩾ mm; et les symptômes étaient incapacitants ou nécessitaient une visite médicale Des rapports non spontanés, spontanés d’autres maladies ou blessures ont été collectés et classés comme légers, modérés ou sévères. Le nombre et la proportion de sujets présentant un événement indésirable ont été tabulés par période d’observation et gravité. Les sérums ont été calculés. La séroréponse induite par le vaccin à des peptides M individuels a été définie comme une augmentation du titre d’anticorps par rapport à la valeur basale La séroconversion a été déterminée par comparaison statistique avec une distribution de donneurs sériques adultes sains. du format de dosage normalisé, et la DO moyenne « normale » et SD ont été déterminées La valeur seuil cutanée calculée pour la séroconversion était supérieure à la moyenne « normale » plus SDs La proportion de sujets obtenant une réponse sérorésistante ou séroconversion à chacun des peptides M ou Spa le peptide contenu dans le vaccin a été déterminé. Pour les essais bactéricides indirects, la réduction moyenne du log dans les doublements bactériens viables a été calculée pour chaque sérotype M. Les adultes n’étant pas immunologiquement naïfs à ces organismes communs, les échantillons de sérum de référence de certains sujets ont démontré des niveaux substantiels de Inhibition spécifique du sérotype de la réplication streptococcique M avant même la réception du vaccin Lorsque le nombre de bactéries viables était inférieur à l’inoculum d’entrée des bactéries viables après une période d’incubation avec des échantillons de sérum de pré-vaccination, le sujet était considéré comme pré-existant. anticorps opsonisant qui empêchait la quantification significative d’une amélioration supplémentaire induite par le vaccin, et ses résultats pour le sérotype en question n’étaient pas inclus dans le calcul des moyennes

Résultats

Données démographiques

Quarante-et-un sujets ont été examinés et répondaient aux critères d’admissibilité et ont été inclus dans l’étude. Tous les sujets inscrits ont reçu des doses de vaccin et un suivi complet. L’âge moyen des sujets était de plusieurs années; % étaient des femmes

Événements indésirables

Effets indésirables cliniques Aucun événement indésirable n’a été signalé dans la période -min après immunisation. Cependant, des réactions locales au site d’injection ont été fréquemment rapportées dans la journée suivant la vaccination. Les réactions au site d’injection les plus fréquemment rapportées étaient: sensibilité et douleur au mouvement du bras. , la plupart des réactions au site d’injection étaient bénignes, survenaient au cours de la période h après l’injection, et la durée médiane était auto-limitée, & lt; Les rapports d’érythème, de chaleur et de sensibilité au site d’injection ont augmenté en fréquence après la deuxième et / ou la troisième dose, comparativement à après la première dose P =, P = et P = respectivement. Cependant, la sévérité moyenne de ces réactions a n’augmente pas avec l’augmentation du nombre de doses

Tableau View largeTélécharger la diapositive Effets indésirables chez des adultes sains au cours de la journée suivant l’immunisation avec un vaccin streptococcique valide du groupe A, par doseTable View largeTélécharger la diapositiveVersements indésirables chez les adultes sains au cours de la journée après immunisation avec le vaccin streptococcique Les symptômes systémiques les plus fréquents étaient les maux de tête% -% des sujets et la fatigue% -% Jusqu’à% des sujets ont rapporté des nausées ou des vomissements suite à la réception de doses de vaccin plus fréquentes Fièvre était rare Les douleurs articulaires étaient légères et peu communes. seulement% -% et% -% de sujets, respectivement Ces plaintes n’étaient pas associées à des constatations physiques objectives, et toutes étaient auto-limitées; aucun symptôme de fièvre rhumatismale aiguë Aucun événement indésirable grave lié au vaccin ni aucun effet indésirable évocateur d’une rhumatogenèse ou d’une néphritogénicité Un événement indésirable grave non relié au vaccin a été signalé chez un sujet âgé de plus d’un an après une fracture de la cheville traumatique. première dose Anomalies de laboratoire Aucune anomalie biochimique ou hématologique significative n’a été observée Aucun sujet n’a développé de protéinurie, d’hématurie ou de globules rouges cliniquement significatifs Aucun changement dans les résultats de l’électrocardiogramme ou de l’échocardiogramme qui suggérait une fièvre rhumatismale aiguë

Réponse anticorps

Réponses anticorps détectées par ELISA Avant immunisation, les sujets étaient séropositifs pour une médiane de% des peptides M dans le vaccin. Les titres d’anticorps moyens géométriques contre tous les peptides de protéine M et Spa augmentaient significativement après l’administration de la troisième dose de vaccin. la troisième dose, titre d’anticorps moyen géométrique est restée significativement plus élevée qu’au départ pour% de peptides protéiques M. L’augmentation moyenne du pli logarithmique ± SEM dans le titre d’anticorps sériques pour tous les antigènes était de ±% ou CI%, – globalement, des peptides antigéniques a évoqué une augmentation moyenne géométrique par rapport à la ligne de base, et l’augmentation était significative pour chaque peptide antigénique P & lt; Les sujets ont expérimenté une augmentation moyenne géométrique du titre d’anticorps à une médiane de% de peptides antigéniques dans le vaccin et une augmentation du titre d’anticorps à & gt; Les écarts-types au-dessus d’une population non-immune prédéfinie correspondent à une médiane de% de la valeur des peptides

Tableau View largeTélécharger la réponseAnti-corps aux antigènes protéiques M et à l’antigène protecteur streptococcique Spa avant l’immunisation et après l’administration de doses de vaccin streptococcique-valent chez les adultes en bonne santéTable View largeTéléchargerAnalyste réponse aux antigènes protéiques M et à l’antigène protecteur streptococcique Spa avant immunisation et après administration de doses de vaccin streptococcique de groupe A -valent chez des adultes en bonne santé

Figure Vue grandDétaillée de téléchargementMoyenne SEM augmentation du nombre d’anticorps spécifiques au sérotype M détectés par ELISA après des doses de vaccin streptocoque du groupe A chez des adultes en bonne santé Les barres d’erreur indiquent SEM Spa, antigène protecteur streptococciqueFigure Voir grandDownload slideMean ± SEM log-fold Des anticorps spécifiques au sérotype M détectés par ELISA après des doses de vaccin streptococcique de groupe A -valent chez des adultes en bonne santé Des barres d’erreur indiquent SEM Spa, antigène protecteur streptococcique

Figure Vue largeDownload diapositivePercentage des sujets démontrant des seroconvertisseurs séroconversion ou seroresponse seroresponse à chaque vaccin antigène peptidique Seroresponse a été définie comme une augmentation ⩾ fois du titre d’anticorps sur la séroconversion de base a été définie comme une augmentation du titre d’anticorps à & gt; SDs au-dessus de la moyenne pour une population non immune Spa, antigène protecteur streptococciqueFigure View largeDownload slidePourcentage de sujets présentant des seroconvertisseurs séroconversion ou seroresponse seroresponse à chaque vaccin antigène peptidique Seroresponse a été définie comme une augmentation de ⩾ fois du titre d’anticorps par rapport à la ligne de base La séroconversion a été définie comme titre d’anticorps à & gt; Réponses anticorps détectées dans le test bactéricide indirect La réduction logarithmique moyenne des numérations bactériennes dans les échantillons sériques obtenus après immunisation, comparée aux échantillons sériques obtenus avant immunisation, est illustrée pour chaque serotype M de la figure. Pour chaque sérotype M, cette valeur moyenne est significativement différente d’une valeur hypothétique sans effet vaccinal, avec P & lt; par échantillon t test Pour la plupart des sérotypes M, – les sujets ont fourni des données à ces moyennes Cependant, dans le cas des bactéries M, M et M parmi les types MAS les plus communs au Canada ,% -% des sujets avaient des anticorps préexistants dans les échantillons de sérum obtenus au départ qui ont soutenu la réduction marquée et l’élimination souvent complète de l’inoculum de test bactérien

Figure Vue largeDownload slideMean log réduction des numérations bactériennes dans les échantillons sériques obtenus après immunisation, comparée aux échantillons sériques obtenus avant immunisation, pour chaque sérotype M de vaccin après incubation de chaque sérotype M du streptocoque du groupe A GAS pour h en présence d’échantillons sériques obtenus à partir de sujets avant ou après immunisation L’antigène protecteur streptococcique Spa, qui n’est pas un antigène de surface GAS sérotypant M mais plutôt un antigène commun à plusieurs sérotypes M, a été exclu des tests bactéricides indirects de Lancefield Les barres d’erreur indiquent SEMFigure View largeDownload slideMean log reduction dans les numérations bactériennes dans les échantillons sériques obtenus après immunisation, par rapport aux échantillons sériques obtenus avant immunisation, pour chaque sérotype M de vaccin après incubation de chaque serotype M de streptocoque du groupe A GAS pour h en présence d’échantillons sériques prélevés chez des sujets avant ou après immunisation Antigène protecteur streptococcique Spa, qui n’est pas un antigène de surface du sérotype GAS M, mais est plutôt un antigène commun à plusieurs sérotypes M, a été exclu des essais bactéricides indirects de Lancefield. Les barres d’erreur indiquent SEM

Essais d’anticorps croisés réactifs tissulaires

Aucun des échantillons de sérum obtenus au départ ne contenait d’anticorps ayant réagi de manière croisée avec l’un quelconque des échantillons de tissus humains testés, et aucun des sujets n’a développé de tels anticorps après ou doses du vaccin.

Discussion

topes, il était alors possible de construire des vaccins protéiques de fusion multivalents qui contenaient des séquences amino-terminales limitées dérivées de plusieurs protéines M conçues pour provoquer des anticorps opsonisants mais pas des anticorps à réactivité croisée tissulaire.La technologie recombinante a été utilisée pour construire des vaccins multivalents contenant, et Des fragments de protéine M liés chez des lapins immunisés avec de tels vaccins tétravalents, hexavalents et octavalents ont développé des taux d’anticorps significatifs et des anticorps opsoniques contre tous les sérotypes inclus Aucun des animaux n’a développé d’anticorps humains réactifs croisés , le vaccin hexavalent s’est montré bien toléré et hautement immunogène chez les adultes en bonne santé . Ces études ont démontré la faisabilité d’évoquer des réponses immunitaires largement protectrices contre des sérotypes multiples de SGA en utilisant des fragments complexes de protéines M hybrides. vaccin valent a été construit qui était composé de rec Des protéines de fusion recombinantes, contenant chacune ou des antigènes peptidiques de la protéine M spécifique de type, sont reliées bout à bout de manière tandem. Ce vaccin était hautement immunogène chez les lapins, provoquant une augmentation d’un facteur antibody des anticorps contre les sérotypes vaccinaux. Les échantillons de sérum étaient largement opsoniques et étaient bactéricides contre la majorité des sérotypes Le développement d’anticorps réactifs croisés tissulaires n’a pas été détecté Les résultats de cet essai de phase I indiquent que le vaccin recombinant à base de protéine M-valent était bien toléré Les événements indésirables immunogènes étaient relativement fréquents, mais ils avaient tendance à être légers et spontanément résolus et avaient généralement un caractère et une fréquence semblables à ceux observés dans notre Centre de recherche sur les essais cliniques, à l’Université Dalhousie; Cet essai n’a pas utilisé de placebo ni de produit de comparaison, et une définition claire du spectre de réaction attribuable au vaccin valide doit attendre un tel essai contrôlé maux de tête et migraine. la formation d’anticorps réagissant de manière croisée avec les tissus humains et le rhumatisme articulaire aigu ou d’autres syndromes post-streptococciques est la réaction indésirable potentielle la plus importante à ce vaccin. Les sujets ont été soumis à un dépistage clinique et biologique minutieux. Aucun sujet n’a développé d’anomalies échocardiographiques ou électrocardiographiques suggestive de la fièvre rhumatismale aiguë Urinalysis série n’a pas démontré le développement de proteinuria significative, hématurie, ou des castes suggérant de glomérulonéphrite Aucun sujet n’a manifesté aucune preuve clinique d’un syndrome post-streptococcique, et le développement d’anticorps réactifs croisés avec les tissus humains n’a pas été obs Le vaccin était hautement immunogène, provoquant une réponse séronégative à une médiane de% de peptides antigéniques chez des sujets individuels et des augmentations statistiquement significatives du titre d’anticorps pour chaque peptide antigénique sur une base de population. Il n’y a pas encore de taux établi d’anticorps M corrélée à la protection contre l’infection Cependant, sur la base de données épidémiologiques publiées récemment, l’immunisation avec ce vaccin à base de protéine M active provoque une réponse sérologique à% d’isolats provoquant une pharyngite,% d’isolats associés à la fièvre rhumatismale et% d’isolats invasifs , y compris près de% des souches associées à la fasciite nécrosante aux États-Unis [,,,] Les résultats de cette étude de phase I appuient l’évaluation continue de ce vaccin à base de protéine M recombinante -valent chez les sujets humains. -tolerated, sans évidence clinique ou de laboratoire du développement des complications immunologiques, le Les données de sécurité doivent être étendues afin de s’assurer que le vaccin ne déclenche pas d’anticorps réagissant aux tissus qui pourraient entraîner le développement d’un rhumatisme articulaire aigu ou d’une glomérulonéphrite avant l’administration de ce vaccin chez les enfants. Meilleure évaluation des réactions au site d’injection Les études de phase II chez l’adulte sont en cours pour augmenter la quantité de données de sécurité disponibles avant de commencer les essais chez l’enfant sur la base de données épidémiologiques démontrant que la majorité des cas de pharyngite, fasciite nécrosante et autres infections invasives streptococciques Par un nombre limité de sérotypes, nous croyons que ce vaccin courant pourrait avoir un impact significatif sur le fardeau global de la maladie streptococcique. En fin de compte, ce vaccin peut s’avérer sûr et efficace et pourrait être administré aux enfants d’âge préscolaire la majorité des cas de pharyngite à GAS et sa complica En général, le vaccin a également la possibilité de réduire de manière significative l’incidence du rhumatisme articulaire aigu, la principale cause de cardiopathie dans le monde.

Remerciements

Nous remercions le personnel du Centre de recherche sur les essais cliniques à Halifax pour l’exécution prudente de l’étude. SAM, SAH, JML, BS, GPS, AW et DMB sont des chercheurs cliniciens au Centre de recherche sur les essais cliniques de l’Université Dalhousie. le soutien financier de la société parraine, ID Biomedical, pour la conduite de ce procès; aucun de ces investigateurs n’a reçu de compensation personnelle et aucun ne détient des intérêts financiers dans le produit MCH, SDS, LFF, PEV, JL et MAR sont employés par le fabricant de vaccins et commanditaire de l’étude, ID Biomedical, et stock propre et / ou stock options dans ID Biomedical JBD est l’inventeur du vaccin utilisé dans cette étude et reçoit un soutien de recherche d’ID Biomedical; Il détient des actions et des options d’achat d’actions d’ID Biomedical et détient des brevets existants et en instance liés au produit de l’étude. ID de soutien financier Biomedical